睿信生物-小鼠线粒体钙离子单向转运蛋白-MCU-ELISA试剂盒
价格
订货量(盒)
¥1300.00
≥1
¥1200.00
≥2
店铺主推品 热销潜力款
㠗㠓㠒㠛㠖㠙㠙㠓㠛㠗㠒
在线客服
公司介绍
生物分析方法开发
分析方法验证
高品质科研elisa试剂盒、化学发光试剂盒开发与定制
供科研使用,不得用于检验。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司,目前可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。依托湖北武汉、江苏南京、福建泉州三大研发及销售 ,布局全国市场。
我们致力于为高等院校、研究机构、试剂厂家、生物制药公司、动物造模公司等科研单位,提供高质量检测试剂盒、方法学开发及实验外包服务,为客户的科学研究提供可靠的技术支持。公司干技术人员均有10年以上的从业经验,是值得您信赖的科研伙伴!
企业建立了完善的研发系统和生产设备,并与知名高校、研究机构、 企业等建立战略合作关系。公司自成立以来,就非常注重企业信息化的建设,我们采用了先进的内部供应链信息处理平台,客户的需求可以准确、处理。
为每一位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。
样本处理:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射,不能使用过期产品。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
小鼠线粒体钙离子单向转运蛋白 MCU ELISA试剂盒
线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测。应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Balb/c小鼠,分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了多株融合细胞。经对融合细胞多次筛选和检测,最终获得4株单克隆抗体,分别对应SCOT Tyr4和Tyr76硝基化后表位,其间接ELISA检测效价分别达到1∶128 000、1∶32 000、1∶512 000和1∶4 096 000,表明抗体具有较强特异性和灵敏度。
研究miR-181a对巨噬细胞表型转化的调控作用及分子机制。方法:利用PMA诱导人白血病单核细胞系THP-1成为静息态巨噬细胞(H-MΦ),培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,分离小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM),然后加入LPS和IFN-γ诱导为M1型巨噬细胞,加入IL-4诱导为M2型巨噬细胞;通过流式细胞仪和免疫荧光技术检测特异性表面标记物CD86、CD206在不同类型巨噬细胞中表达;应用Real-timePCR和Westernblot方法检测不同表型巨噬细胞中M1型和M2型特异性标志物IL-1β、CD163等m RNA及蛋白表达水平;采用ELISA方法检测细胞培养基中分泌因子的含量;荧光素酶报告基因技术分析mi R-181a对靶基因的靶向抑制作用;通过Transwell法检测细胞的侵袭和迁移能力。结果:M2细胞中miR-181a表达量高于M1细胞,M1向M2转化后可使mi R-181a的表达升高,当M2向M1表型诱导后,miR-181a的表达量降低;抑制M2型巨噬细胞内源性mi R-181a表达,可促进M1型巨噬细胞标志物TNFα,IL-1β,HLA-DR和CD86的表达,降低M2型巨噬细胞标志物。